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茶皂素對蝦池中幾種有害魚類的毒性Ⅱ.茶皂素對蝦池中幾種有害魚類的毒性 朱全芬1 夏春華1 朱伯榮1 梁亞全2 孫修濤2 唐麗萍1 (1中國農業科學院茶葉研究所,杭州) (2中國水產科學研究院黃海水產研究所,青島) 摘 要 通過對蝦池中6種魚類試驗結果表明,茶皂素類對魚類具有很強的毒性作用,其中茶皂素Ⅰ對鱸魚、紋縞鰕虎魚、鈍尖尾鰕虎魚、梭魚、三刺魨及頜針魚的全致死濃度為0.5—0.7ppm；茶皂素Ⅱ對鱸魚和紋縞鰕虎魚全致死濃度在1ppm左右。兩種型號茶皂素對魚類、對蝦及沙蠶的毒性差異很大，且能在海水中自行降解至無毒，可作為對蝦養殖前清池或養殖中清除有害魚類的一種理想、安全的藥劑。 關鍵詞：茶皂素，魚毒活性，蝦池，魚類，清池劑 前 言 捕食對蝦的魚類多達17種。據解剖觀察，1尾體長10.7厘米的鱸魚胃中有2厘米的對蝦25尾；1尾15.5厘米的四指馬鲅胃中有體長4—4.5厘米對蝦5尾；9尾小鱸魚在水體2米的池內，不到50分鐘將45尾體長2.0—2.5厘米的對蝦幼仔一食而空；29尾平均體長12.5厘米的黑鯛胃中發現對蝦22尾。可見在對蝦養殖魚類危害之嚴重。 茂野曾以紋縞鰕虎魚、鳚魚和對蝦為材料，驗證魚藤根的魚毒效果，含有4—5%的魚藤酮的魚藤粉，對這二種魚的致死濃度為0.5—1ppm，對蝦可耐至5ppm。茶皂素的魚毒作用如何？本研究以鱸魚、鈍尖尾鰕虎魚、紋縞鰕虎魚和梭魚為主要對象，對6種魚類進行了兩種型號茶皂素的毒性比較試驗。 材料和方法 （一） 材料 1. 茶皂素同Ⅰ報 2. 供試魚類 紋縞鰕虎魚（Tridentiger trigonocephalus GLL）體長1.6—7.9 厘米，平均3.2厘米；鱸魚（Lateolabrax japonicus Cuvier & Yalencien）體長8.8—10.6厘米，平均9.58厘米；鈍尖尾鰕虎魚（Chaeturichthys hexanema Bleeker）體長9.7—18.8厘米，平均14.04厘米；梭魚（Mugil so-iny Basilewsky）體長9.4—19.4厘米，平均11.06厘米；三刺魨（Tricenthus brevirostris Temminck & Schlegel）；頜針魚（Tylosurus anastomlla Cuvier & Valenciennes）。 （二） 方法 試驗在青島市黃海水產研究所太平角養殖室與昌邑縣下營鎮濰坊市海水養殖場兩地進行。 紋縞鰕虎魚采用直徑48厘米、高50厘米的環氧樹酯桶飼養，總溶液70升；鱸魚及梭魚等其他幾種采用80×40×50厘米的全玻璃水簇箱放養，總溶液120毫升；每個處理組放養10尾；水源與Ⅰ報所載相同。 對于處理設置，為比較兩種型號茶皂素的魚毒活性強弱、半致死與全致死濃度以及致死速度與濃度的關系，對紋縞鰕虎魚進行較寬濃度范圍試驗，其中茶皂素Ⅰ設0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.45、0.5、1、2、3、4ppm等11個處理組；茶皂素Ⅱ設0、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、1、2、3、4ppm等12個處理組。其他魚種以茶皂素Ⅰ為主進行試驗，濃度設置至全致死為止，最高濃度在0.5—0.7ppm，其中鱸魚設0、0.3、0.35、0.4、0.41、0.42、0.43、0.44、0.45、0.5ppm等9個處理；鈍尖尾鰕虎魚設0.35、0.40、0.45、0.50、0.60、0.70ppm等6個處理；梭魚設0、0.3、0.35、0.4、0.5、0.6、0.7等7個處理。三刺魨和頜針魚與梭魚一起試驗。 觀察項目除死亡數及死亡速度以外，輔以溶氧量測定。觀察持續時間因要求不同分48和96小時。 結 果 茶皂素的魚毒活性共進行了13批試驗，其主要結果歸納如下： 1. 紋縞鰕虎魚:又稱小鰕虎魚或花頭魚，在分類上屬鰕虎魚科（Gobiidae），棲潮間帶，個體較小，體長在10厘米以下，主要危害蝦仔，是蝦池中的有害魚類。 不同濃度的茶皂素對紋縞鰕虎魚毒性試驗結果表明（表1），兩種型號茶皂素對它均有毒性，其中茶皂素Ⅰ的全致死濃度在0.5ppm左右，茶皂素Ⅱ則需要1ppm，對應的半致死量（LD50），前者為0.3—0.4ppm，后者在0.6—0.7ppm，所以茶皂素Ⅰ的魚毒活性強于茶皂素Ⅱ。此外，從試驗結果還可以看出，紋縞鰕虎魚中毒對茶皂素的濃度非常敏感，以茶皂素Ⅰ為例，從沒有死亡到大量死亡的濃度區間在0.3—0.4ppm，僅0.1ppm之差，且死亡速度隨濃度提高而加快。 表1 兩種茶皂素對紋縞鰕虎魚的毒性試驗 Table 1 Toxicities of two forms of tea saponin to Tridentigic trigonocephalus GLL
*96小時內死亡數 *Mortality within 96 hours 全部致死的幾個處理的溶氧量測定表明，其死亡實屬中毒，并非缺氧所致。魚大量死亡時的溶氧量保持在5.3—5.4毫升/升相差無幾。 魚體解剖觀察發現，中毒死亡的魚鰓呈灰白色，鰓絲界線不分明，并發粘，明顯不同于自然死亡的魚鰓。至于茶皂素引起魚類中毒死亡的原因尚須進一步研究。 2.鱸魚：在分類學上屬鮨科（Serranidae），在淺海分布很廣，生性活潑，游動速度快，活動在水域的中上層，捕食對蝦量大，是蝦池中危害嚴重的一種魚類。試驗結果表明（表2），鱸魚對茶皂素Ⅰ很敏感，其全部致死為0.5ppm；半致死濃度與全致死濃度很接近，從引起中毒反應到全部死亡的藥物濃度區間很小；毒性反應速度快，致死反應在16小時內見效（0.5ppm這個處理6小時時死亡率已達90%），超過16小時以后基本不再有死亡發生。 表2 茶皂素Ⅰ對鱸魚的毒性試驗 Table 2 Toxicity of tea saponinⅠto Lateolabrax japonicus Cuvier & Yalencien (單位：死亡率% unit ：death rate %)
茶皂素Ⅱ對鱸魚毒性試驗結果，其毒性確實低于茶皂素Ⅰ，濃度在0.6—0.9ppm范圍內，48小時中死亡率為90%，所以它的全致死濃度大于1ppm。 3. 鈍尖尾鰕虎魚：又稱大鰕虎魚、狗 ，也屬鰕虎魚科（Gobiidae）。其特點，成魚個體較大，棲于池底筑穴生活，雖然游動性小，但專食蛻皮時臥于池底的蝦體，故也是蝦池中一大有害魚類。試驗結果表明（表3），茶皂素Ⅰ對它的全致死濃度略高于鱸魚，在0.6—0.7ppm左右。而且中毒引起的死亡反應沒有鱸魚快，除0.7ppm這一處理組以外，其他各組超過16小時后還繼續有死亡發生，這可能與其活動遲緩，呼吸量小，相應的藥物吸入慢有關。 表3 茶皂素Ⅰ對鈍尖尾鰕虎魚的毒性試驗 Table 3 Toxicity of tea saponinⅠto Chaeturchthys hexanema Bleeker
4.梭魚：在分類學上屬鯔科（Mugilidae），生活于水域的中上層。這類魚不食對蝦，因此并不構成危害，在池中以食對蝦的殘留的餌料為生，也是蝦池的一種魚類。試驗發現梭魚比較難飼養，捕撈時易受傷，對照的死亡率也較高，但多次重復試驗結果仍然可以看出，茶皂素對梭魚同樣具有毒性作用，死亡率隨著濃度而遞增，全致死濃度0.7ppm左右，且毒性反應也快，16小時可見效（表4）。 此外，在梭魚試驗中。同時對三刺魨和頜針魚（屬水域上層魚類）進行觀察，0.5ppm的茶皂素Ⅰ均能使這兩種魚致死，死亡速度快于梭魚。 表4 茶皂素Ⅰ對梭魚的毒性試驗 Table 4 Toxicity of tea saponinⅠto Mugil so-iny Basilewsk (單位：死亡率% unit ：death rate %)
討 論 通過茶皂素對生活于淺海水域中不同水層的6種魚類，其中包括底層或穴居的鰕虎魚類，中層的鱸魚、梭魚魚類和上層的三刺魨、頜針魚的毒性試驗，可以確認，兩種型號茶皂素特別是茶皂素Ⅰ，用于對蝦養殖中有害魚類的清除是一種理想的藥物，且優于農藥魚藤酮，它不僅魚毒活性大，而且蝦池使用的安全性大。 椐茂野對紋縞鰕虎魚和對蝦的研究結果，在充氣條件下，含有5.0%魚藤酮的魚藤粉，對魚的致死濃度為0.5ppm，與茶皂素Ⅰ相同，但濃度在5ppm時，對蝦僅活14小時，10ppm時只活8小時，而茶皂素Ⅰ的使用安全，在不鼓氣情況下，大于10ppm，鼓氣時高至80ppm，經96小時也很少死亡。并且，應用于生產上，大面積使用時，藥劑往往很難以均相而造成局部濃度過高的現象，魚藤酮就有一定的危險性，因而不宜在養殖池中使用。況且我國的魚藤酮來源于進口，價格昂貴，貨源又不穩定，而茶皂素在我國有豐富的資源，目前已有相當規模的生產能力，貨源可靠，這是魚藤酮無法與它比較的。 有關茶皂素對魚類的毒性機理問題，從試驗初步結果來看，引起魚類中毒主要在于破壞血液，造成溶血所致，但屬何種溶血類型，是滲透性溶血、化學性溶血或生物性溶血尚不清楚。 茶皂素對對蝦與魚類的毒性大小不一，是否與他們的血液結構不同有關？是血球膜的不同，還是攜帶氧氣的載體不同？業已清楚，魚的血液中攜帶氧氣的是血紅素，而蝦的血液傳遞氧氣的是血蘭素。血紅素的核心是Fe+ +，而血蘭素的核心是Cu+ +，前者的血液為紅色，后者的血液是無色的。雖然兩者均以鰓呼吸，方式相同，但藥劑對它的作用是不同的。所以，關于茶皂素對魚的毒性機理值得進一步研究。 通過茶皂素對魚類及對蝦的毒性試驗認為，茶皂素是一種性能良好的清池劑，可以實現對蝦養殖———————“魚死而蝦不死”。 結 論 1.兩種型號的茶皂素均具有明顯的魚毒活性作用，茶皂素Ⅰ則更強。茶皂素Ⅰ對鱸魚、紋縞鰕虎魚、三刺魨及頜針魚的全致死濃度為0.5ppm，LD50為0.3—0.4ppm；對梭魚和鈍尖尾鰕虎魚全致死濃度在0.6—0.7ppm，LD50約0.4ppm；茶皂素Ⅱ對紋縞鰕虎魚的全致死濃度為1ppm，而1ppm的茶皂素Ⅱ對鱸魚致死量為90%。兩種茶皂素的毒魚速度快，中毒死亡在16小時內可見效。 2.茶皂素類對魚類、對蝦及餌料生物——沙蠶的毒性差異較大，以其作為清池劑或者對蝦養殖中的有害魚類的清除，是一種非常理想的藥物。為確保有害魚類的清除而不影響對蝦及沙蠶的生存，兩種茶皂素的應用濃度在1—2ppm為宜。 |
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